肉的宰后嫩化核心归因于肌原氯纶设计的受损，肌原氯纶设计是由内源性核核淀粉酶电离发生反应酶可生物降解肌原氯纶和肿瘤体生殖癌细胞系骨架核核淀粉酶引发的。与几十块年来始终是关注新闻大家都讨论的钙核核淀粉酶酶多种，胱天核核淀粉酶酶（caspases）最进将成为感动手技能得话题。胱天核核淀粉酶酶在肿瘤体生殖癌细胞系凋亡的程序执行的阶段起着至关比较重要的角色，这其中caspase-3在去逝核核淀粉酶电离发生反应中的角色是一定要多方位面和冗杂的，故此应当进一部探析。S-亚硝基化用调整钙解放、能量是什么分泌、核核淀粉酶质可生物降解和肿瘤体生殖癌细胞系凋亡来调整吃起来，以及嫩度和持水技能。企业早期探析会发现S-亚硝基化能够 上涨依赖性线粒体的caspase-3级联发生反应，这有可能是肌肿瘤体生殖癌细胞系凋亡和羊肉高品质转变的因为。caspase-3的探析侧重是其与肿瘤体生殖癌细胞系凋亡的干系，那么，很小有探析探析S-亚硝基化调整caspase-3的措施。

2024年9月由长沙渔业大学生张万刚教受管理团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱海洋生物为该研究提供了亚硝基化体现组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文版问题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

中文核心期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2026年后果细胞：5.7

刊出时间段：2024年9月

老客户政府部门：南京农业大学

探析资料：蛋白

拜谱带来了技術：亚硝基化修饰组学

技术性路线图：

一、探索最终

01.Caspase-3几丁质酶

到目前为止尚不很清楚NO对caspase-3的治理和改善能力会不会归因于NO介导的S-亚硝基化，不一样浓度值梯度方向的GSNO最为外源性NO制造，以促进caspase-3的身体之外S-亚硝基化。结局发现，与就没有GSNO的组不同之处，100、200和400μM GSNO组的caspase-3化学活化明显有效影响（图1），与已经新闻稿件同样。GSNO进行处理有效影响caspase-3化学活化的不确定病因仍进一步指出。

图1 各不相同溶液浓度的GSNO进行处理对caspase-3渗透性的干扰

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化的程度

设计Caspase-3的亚硝基化的情况，以体现了GSNO对Caspase-3的不良反应性。经GSNO处理后，查重到caspase-3球蛋白S-亚硝基化力度不断增加（图2）。以上后果是因为，外源性GSNO培育可成功失败诱导型caspase-3的身体之外S-亚硝基化。最令 特别的是，在没GSNO会有的相较比较组中查重到一种绚烂的S-亚硝基化带，这是因为caspase-3有机会会发生内源性的S-亚硝基化。最后，本设计中caspase-3的S-亚硝基化的情况较高，而caspase-3的活性酶类降，这与开始之前的设计同一。不过，caspase-3的特女性朋友S-亚硝基化修饰语位点尚不清析，还必须进步的探求。

图2 GSNO治疗对caspase-3S-亚硝基化水平面的关系

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的队列。天蓝色标签的队列代表S-亚硝基化肽，朱红色标签的C代表S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3溶解结血清

结血清当作的一种决定性的内部骨架血清，在提升肌内部的设计的的设计全面性和回缩性角度起着决定性的作用，分析S-亚硝基化caspase-3对结血清光光降解的敏各样性具备着决定性目的。与Std（未用胱天血清酶-3和GSNO孵育的初始状态肌钎维血清）组相对比，0 μM GSNO组（肌原钎维和caspase-3的孵育，无GSNO）的全面结血清含水量显著性减小，显示系统caspase-3对结血清具备着因素的血清水解反应能力素质。在GSNO孵育后，全面结血清的含水量强烈多（P < 0.05）。因此，当GSNO质量浓度上升时，全面结血清的含水量将持续上浮（P < 0.05）（图5）。某一知道反映，SNO绘制的caspase-3以情况忽略的方法减弱结血清的光光降解。

图5.S-亚硝基化caspase-3化学降解结核蛋白

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3化学降解肌钙核蛋白-T

肌钙血清-T (TnT)是原肌球血清缓解全权负责肌肤收縮的丝条的必备肌原食物棉纤维板血清。TnT的挥发塑料的特征是检则到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化环境下，caspase-3对TnT的挥发塑料实际情况如图已知6图示，与Std组（不标caspase-3和GSNO的肌原食物棉纤维板）相对比，caspase-3组中30 kDa TnT段落正相关性扩大，是因为caspase-3进行了TnT的挥发塑料，除此以外，caspase-3与GSNO的孵育引发30 kDa TnT减低。在100和200 μM GSNO组之中没了检则到很深的一定的差异(P > 0.05)，而当GSNO的质量浓度做到400 μM 时，该段落正相关性增多(P < 0.05)。这一些显示是因为了SNO体现语的caspase-3对TnT挥发塑料的能够抑自制用。结血清和TnT是caspase-3的过敏底物，而GSNO补救调低caspase-3的吸附性很有可能引发肌原食物棉纤维板血清挥发塑料因素调低。综合上面的表明，NO诱发的S-亚硝基化可不可以实现体现语半胱氨酸残基来缓解caspase-3的吸附性，转而进每一步危害其对结血清和TnT的血清油脂水解力，因而危害牛肉片口感。

图6. S-亚硝基化caspase- 3化学降解肌钙球蛋白-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结

本研发意在浅议S-亚硝基化对caspase-3表达的影向下列关于最后对羊肉片肌原植物黏胶纤维离体化学降解的影向。淀粉酶S-亚硝基化能能表达caspase-3的半胱氨酸残基，因而会导致caspase-3几丁质酶影响，进几步减缓了其对羊肉片肌原植物黏胶纤维淀粉酶的淀粉酶水解反应的能力。

三、拜谱总结ppt

的探索进行了酶活检验，亚硝基化绘制组学分析一下，WB等的检测手法，发展淀粉酶S-亚硝基化就能够绘制caspase-3的半胱氨酸残基，这会造成了caspase-3抗逆性的降低了，齐头并进步减缓了其对鸡肉肌原氯纶淀粉酶的淀粉酶淀粉水解水平。本的探索为说明淀粉酶质亚硝基化对肉质地的改善制度展示 了了个新的上帝视角。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、呈现血清质组学、分解组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系列货品货品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺过酸、total防氧化还原故宫场景、氧化钙含量巯基，欢迎大家咨询！

选取论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663